The current situation of AIDS Tests

三、HIV RNA定量测定（病毒载量检测）及HIV核酸定性检测

HIV核酸检测可用于HIV感染的辅助诊断、病程监控、指导治疗方案及疗效判定、预测疾病进展等。常用的HIV病毒载量检测方法包括逆转录PCR实验（RT-PCR）、核酸序列扩增实验（NASBA）、分支DNA杂交实验（bDNA）以及实时荧光定量PCR技术。值得注意的是，每一种HIV RNA定量系统都有其最低检测限，即可以测出的最低拷贝数或国际单位，RNA定量检测时未测出不等于样品中不含有病毒RNA，因此HIV核酸定性检测阴性，只可报告本次实验结果阴性，但不能排除HIV感染；HIV核酸检测阳性，可作为诊断HIV感染的辅助指标，不能单独用于HIV感染的诊断。报告HIV核酸定量检测结果时应按照仪器读数报告结果，注明使用的实验方法、样品种类和样品量，当测定结果小于最低检测限时，应注明最低检测限水平。
HIV核酸定性检测也可用于HIV感染的辅助诊断，目前在分析HIV基因亚型和变异等基础研究中应用。通常使用PCR或RT-PCR技术，使用分子生物学实验室通用的扩增试剂，引物可来自文献或自行设计，应尽量覆盖所有或常见的毒株，也可使用复合引物。报告定性检测结果时应注明反应条件和所使用的引物序列。此外，利用核酸检测方法的高度敏感性，使用集合核酸扩增检测技术和方法，对高度怀疑感染人群且抗体阴性的样品进行集合核酸检测，可及时发现窗口期感染者。该方法较单份样品的核酸检测具有更高的成本效益。
四、CD4+ T淋巴细胞计数

CD4+T淋巴细胞是人体免疫系统最重要的细胞之一。HIV以CD4+T淋巴细胞为靶细胞，感染后可导致CD4+T淋巴细胞进行性下降，使机体免疫功能受损，最终因机会性感染及肿瘤而死亡。CD4+T淋巴细胞绝对值的检测在HIV感染的以下方面发挥了重要作用：了解机体的免疫状态以确定疾病分期、监测疾病进程、评估疾病预后、制定抗病毒治疗及机会性感染预防性治疗方案及评估抗病毒治疗疗效等。目前用于CD4+T淋巴细胞检测的方法分为自动检测方法和手工操作法。自动检测方法包括流式细胞仪（单平台一步法、多平台三级程序法）和专门的细胞计数仪，手工操作方法则需要显微镜或酶联免疫试验设备。目前检测CD4+T淋巴细胞数的标准方法为流式细胞仪，可得出CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞的绝对值及占淋巴细胞的百分率。为确保检测的准确性，应制定质量保证计划，建立内部质量控制制度，并参加室间质量评价。

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