The Lymphocyte Subsets

(1)    应用CD3/CD19区分T淋巴细胞和B淋巴细胞

CD3是T细胞的特异性抗原，CD19则用来识别B细胞．因此应用CD3/CD19双标试剂即可以区分和鉴定T淋巴细胞和B淋巴细胞亚群；CD3、CD19阳性表达为独立的阳性细胞群体。如出现双阳性细胞均为假象。这样就可不用同型对照来设定阴性或阳性界线。此外，此检测还会出现双阴性群体，这些都是NK细胞，这些细胞也提供了双阴性群体的对照。

(2) 应用CD3/CD4来鉴定CD4+T细胞

首先用CD3来区分全部T细胞．而CD3/CD4双阳性细胞为真正的辅助/诱导性T细胞，这是HIV病毒感染的主要对象;CD3-/CD4+细胞群是由单核细胞组成，这些细胞相对于CD4+和T细胞来说弱表达CD4，在光散射参数的位置分布也较广。所以CD3/CD4抗体组合能够完全把CD4阳性辅助/诱导性T细胞区分开。另外，应用适当的双色组合如CD4与CD29,CD4与CD45RA,也可以测定T辅助细胞的的亚群。如CD4+2H4(CD 45RA)+细胞是Ts的诱导细胞;CD4+ 4B4 (CD29)+细胞Th的诱导细胞。同理,•利用CD8+CD45RA和CD8+CD29+ S6F1可测定T抑制细胞的亚群。T辅助细胞还可分成Th1、Th2两个亚群，同时标记细胞内细胞因子IFN-γ和IL-4，可区分Th1细胞（CD4+/IFN-γ+）和Th2细胞（CD4+/IL-4+）。

（3）应用CD3/CD8鉴定CD8+T淋巴细胞

CD8的表达不只限于细胞毒性T细胞，此抗原在部分的NK细胞上也能检测到。所以利用CD3抗体才能把该细胞亚群分开。
若采用三色测定可给出更为准确的各亚群的情况:如真正的T辅助细胞应是CD3+ CD4+CD8-,真正的T抑制细胞应是CD3+CD4- CD8+,单标CD8+细胞中不仅有T抑制细胞,还含有30%左右的NK细胞;而CD3+CD4-CD8-细胞群是γδT细胞,此类细胞与感染有关．CD3+CD4+ CD8-细胞+CD3+CD4-CD8+细胞+CD3+CD4-CD8-细胞+CD3+CD4+CD8+细胞=CD3+细胞。

(4)  自然杀伤细胞（NK）的检测

①CD16(FcRⅢ)表达于大多数NK细胞上，但也表达于中性粒细胞，此抗原NK细胞的表达比较弱，并在NK细胞活化时丢失；②CD56表达于大多数NK细胞上，也表达于一些T淋巴细胞，与CD3联合使用可以区分CD3+/CD56+T淋巴细胞和CD3-/CD56+NK细胞。③联合使用3种抗体最完全地鉴定所有的NK细胞。NK细胞或表达CD16，或表达CD56，但它们不表达CD3。CD16和CD56联合使用，根据荧光强度可将NK细胞从双阴性细胞中区分出来。这样运用该试剂组合，NK细胞可形成独立的群体与其它细胞相区分。

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