γ干扰素释放分析T-SPOT.TB诊断结核感染临床应用

活动性结核与潜伏性结核感染的鉴别：机体免疫力低下时, 免疫系统与结核菌之间的平衡被打破,结核菌得以大量复制, 从而导致结核活动。结核菌数量增加时被加工呈递的抗原也会增加, 因此被活化的抗原特异性效应T 细胞的数量也会随之增加,在T-SPOT.TB中反映为斑点数目的增加。基于上述原理, SFCs的数量有可能存在一个界值用来鉴别活动性结核和潜伏性结核感染。

Janssens等研究了T-SPOT-TB 在鉴别潜伏结核和活动性结核中的作用, 他们将潜伏结核定义为T-SPOT-TB阳性的无症状结核接触者。活动性结核患者在治疗2周内进行T-SPOT-TB 测试, 减少了治疗对检测的影响。T-SPOT.TB结果在活动性结核患者中显著高于潜伏性结核人群(P<0.0001)。受试者工作特征曲线分析显示以4915 SFCs为分界值鉴别活动性与潜伏性结核感染, 其敏感性为83%, 特异性为74% , 但两者间的交叉较大。Chee等对230例培养阳性活动性结核患者和183例结核接触者进行了T-SPOT.TB 检测, 在ESAT-6肽段库中, 活动性结核患者与结核接触者的SFCs数分别为108 vs140 SFCs /106PBMCs(P<0.001), 在CFP-10 肽段库中, 分别为148 vs1 52 SFCs /106PBMC s (P<0.001),但两者重叠区域较大。
潜伏性结核感染的斑点数有可能高于活动性结核, 因此T-SPOT.TB 难以区分活动性结核和潜伏性结核感染。其原因可能有两点: (1) 潜伏性结核感染者的免疫功能良好, 少量的抗原刺激就激发出活跃的保护性免疫; (2) 活动性结核患者免疫功能低下, 大量的抗原刺激也不足以激起有效的细胞免疫。T-SPOT.TB的斑点数虽然并不精确地与结核活动程度呈正相关, 但仍然存在着结核活动程度越高斑点数越多的趋势。
结核发病风险的预测 T-SPOT.TB 能否预测活动性结核对临床意义重大, 尤其在我国这样资源相对匮乏的高负担国家。准确诊断潜伏性结核感染者并对其进行选择性的预防性治疗, 可以更加合理地运用资源以及减少患者的负担和痛苦。Brodie等对56名涂阳肺结核密切接触者与40名无接触史者进行病例对照研究, 结果显示T-SPOT.TB阳性与密切接触具有更好的相关性, 比值比为219(P=0.03), 能更加准确地诊断潜伏性结核感染。Hesse-ling等对82名家庭密切接触者的横断面研究也得出了相似的结论。Bakir等对908名与涂阳肺结核患者接触过的儿童进行了为期3年的前瞻性研究,在381名T-SPOT.TB 结果为阳性的接触者中, 最终11 名发展成为活动性结核, 其发生风险是T-SPOT.TB阴性接触者的3186倍(P=0.024)。而且与TST 相比, 以T-SPOT.TB 为标准能够更加准确地锁定需要预防性抗结核治疗的感染者。T-SPOT.TB的斑点数越多, 发生活动性结核的可能性越大, 而且短期内有过结核接触史的患者T-SPOT.TB的斑点数较多时更有意义。此外, 对于T-SPOT.TB 阳性的人群, 定期的复查监测斑点数的变化是很有必要的。类似于TST, 如果T-SPOT.TB 的斑点数在短时间内显著增加, 则强烈提示体内结核活动, 此时给予预防性的治疗十分必要 。
综上, T-SPOT.TB 在诊断结核感染方面具有良好的敏感性和特异性, 在鉴别活动性结核和潜伏性结核感染、预测结核发病风险方面也具有一定意义,已被越来越多的国家认可并应用于临床诊断。基于结核抗原特异性T 细胞向病变部位集中的特点, T-SPOT.TB技术的检测物已不仅局限于静脉血, 支气管肺泡灌洗液、痰液、胸腹水、脑脊液等也可用于对肺内及肺外结核的诊断。在现有结核诊断方法存在诸多缺陷的今天, T-SPOT.TB可以给临床医师提供有力参考, 指导临床实践。

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